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間充質干細胞無血清培養基P04-77350K適用于造血干細胞培養,即用型PowerStem HPSC。
間充質干細胞無血清培養基P04-77350K儲存方法:2-8℃
應用:
應用于(yu)人來源(yuan)的(de)T細(xi)胞(bao)培(pei)養擴增,培(pei)養基需(xu)要添(tian)加刺(ci)激性抗(kang)體和細(xi)胞(bao)因子,另外每升培(pei)養基需(xu)要添(tian)加20ml 200mM的(de)L。
操作:
平板培(pei)養:
1. 按照已確定的(de)方(fang)法來(lai)準備(bei)新鮮或(huo)者凍存(cun)的(de) PBMNCs (外周血單個(ge)核細胞)
2. 用血計(ji)數器計(ji)數細胞數量
3. 轉移適當數(shu)量的(de)(de)細胞到含有培養(yang)基(已加(jia)入(ru)細胞因子和刺(ci)激(ji)抗體)的(de)(de)培養(yang)瓶中
4. 把(ba)培(pei)養瓶放入培(pei)養箱中, 37°C , 5% CO2 培(pei)養.
產品特性:
Nobimpex 無血清 T 細胞培(pei)養(yang)基 (Product number N103-1000) 已(yi)經經過嚴格的測(ce)試可用(yong)于(yu) PBMNC 中的 T 細胞擴(kuo)增。本產品已(yi)與其他幾種商業化(hua)可用(yong)的無血清培(pei)養(yang)基做(zuo)了 T 細胞擴(kuo)增比較。實驗中,200,000 PBMNCs/ml 在(zai)本產品和另一商業化(hua)培(pei)養(yang)基中培(pei)養(yang) 7 天(tian),培(pei)養(yang)基含有 100 IU/ml IL-2 和 anti-CD3 (OKT3, 20ng/ml) 抗體。.
實驗中(zhong)擴增的(de) T-細(xi)(xi)胞(bao)(bao)使(shi)用(yong) 51 鉻(ge)釋放分析(xi)來(lai)測(ce)試細(xi)(xi)胞(bao)(bao)溶解(jie)能力。靶(ba)(ba)細(xi)(xi)胞(bao)(bao) (K562, 人慢性白血病細(xi)(xi)胞(bao)(bao)), 使(shi)用(yong) 51 鉻(ge)標記并連(lian)接到(dao) anti-CD3 (OKT3) Fc 受體.。當與效(xiao)應或者細(xi)(xi)胞(bao)(bao)毒 T 細(xi)(xi)胞(bao)(bao)混合時,,靶(ba)(ba)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)就會凋亡或者溶解(jie),并釋放 51 鉻(ge).。上清(qing)中(zhong) 51 鉻(ge)的(de)釋放量(liang)與靶(ba)(ba)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)死亡及功(gong)能 T 細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)數量(liang)成正(zheng)比。