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造血干細胞無血清培養基P04-77450K適用于造血干細胞培養,即用型PowerStem HPSC。
造血干細胞無血清培養基P04-77450K儲存方法:2-8℃
應用:
應用于人來源的(de)T細胞培養(yang)(yang)擴增,培養(yang)(yang)基(ji)需要(yao)(yao)添加刺激(ji)性抗體和細胞因子,另外(wai)每升培養(yang)(yang)基(ji)需要(yao)(yao)添加20ml 200mM的(de)L。
操作:
平(ping)板培(pei)養:
1. 按(an)照已確定(ding)的方法來準備新鮮或(huo)者(zhe)凍存的 PBMNCs (外周血單個核細胞)
2. 用血計(ji)(ji)數器計(ji)(ji)數細胞(bao)數量(liang)
3. 轉移適當數量(liang)的細(xi)胞到含有培養(yang)(yang)基(已加入細(xi)胞因子(zi)和刺激(ji)抗體(ti))的培養(yang)(yang)瓶中
4. 把培養(yang)瓶放入(ru)培養(yang)箱中, 37°C , 5% CO2 培養(yang).
產品特性(xing):
Nobimpex 無血(xue)清(qing)(qing) T 細(xi)胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基 (Product number N103-1000) 已(yi)經經過嚴格的測試可用于 PBMNC 中(zhong)(zhong)的 T 細(xi)胞(bao)擴增(zeng)。本產品已(yi)與其他幾種商(shang)業化(hua)可用的無血(xue)清(qing)(qing)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基做了(le) T 細(xi)胞(bao)擴增(zeng)比(bi)較。實驗(yan)中(zhong)(zhong),200,000 PBMNCs/ml 在本產品和(he)(he)另一商(shang)業化(hua)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基中(zhong)(zhong)培(pei)(pei)養(yang)(yang) 7 天,培(pei)(pei)養(yang)(yang)基含有 100 IU/ml IL-2 和(he)(he) anti-CD3 (OKT3, 20ng/ml) 抗體。.
實驗中(zhong)擴增的(de) T-細胞(bao)使用(yong) 51 鉻(ge)釋放(fang)分析來測試細胞(bao)溶解能(neng)力。靶細胞(bao) (K562, 人慢性白血病(bing)細胞(bao)), 使用(yong) 51 鉻(ge)標記并(bing)連接到 anti-CD3 (OKT3) Fc 受體.。當與效應(ying)或(huo)者(zhe)細胞(bao)毒 T 細胞(bao)混(hun)合時(shi),,靶細胞(bao)就(jiu)會凋亡或(huo)者(zhe)溶解,并(bing)釋放(fang) 51 鉻(ge).。上清中(zhong) 51 鉻(ge)的(de)釋放(fang)量與靶細胞(bao)的(de)死亡及功(gong)能(neng) T 細胞(bao)的(de)數量成正比(bi)。