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適用于培養內皮細胞,即用型。
內皮細胞無血清培養基Kit P04-0065K儲存方法:2-8℃
應用(yong):
內皮細胞無血清培養基Kit P04-0065K應用于人來源的T細胞培養擴增,培養基需要添加刺激性抗體和細胞因子,另外每升培養基需要添加20ml 200mM的L。
操(cao)作(zuo):
平板(ban)培養:
1. 按照已(yi)確定的方法(fa)來準備新(xin)鮮或者凍存(cun)的 PBMNCs (外周血(xue)單個核(he)細(xi)胞)
2. 用血計(ji)數器計(ji)數細(xi)胞數量
3. 轉移(yi)適(shi)當(dang)數量(liang)的細胞(bao)(bao)到含有培養基(已加入(ru)細胞(bao)(bao)因子和刺激抗體(ti))的培養瓶中
4. 把(ba)培(pei)養瓶(ping)放(fang)入培(pei)養箱中(zhong), 37°C , 5% CO2 培(pei)養.
產品特性:
Nobimpex 無血(xue)清 T 細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji) (Product number N103-1000) 已經經過嚴格的測試可用(yong)于 PBMNC 中(zhong)的 T 細(xi)胞(bao)擴(kuo)增。本(ben)產品已與其他幾種商(shang)業(ye)化(hua)可用(yong)的無血(xue)清培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)做了 T 細(xi)胞(bao)擴(kuo)增比較。實驗中(zhong),200,000 PBMNCs/ml 在本(ben)產品和(he)另一商(shang)業(ye)化(hua)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)中(zhong)培(pei)養(yang)(yang)(yang) 7 天,培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)含有 100 IU/ml IL-2 和(he) anti-CD3 (OKT3, 20ng/ml) 抗體。.
實驗(yan)中(zhong)擴增的 T-細(xi)胞(bao)使用 51 鉻釋(shi)放(fang)分析來測試細(xi)胞(bao)溶(rong)解(jie)(jie)能力(li)。靶(ba)細(xi)胞(bao) (K562, 人慢性白(bai)血病(bing)細(xi)胞(bao)), 使用 51 鉻標記并(bing)連接到 anti-CD3 (OKT3) Fc 受體.。當與效應(ying)或者(zhe)(zhe)細(xi)胞(bao)毒 T 細(xi)胞(bao)混合時,,靶(ba)細(xi)胞(bao)就會(hui)凋亡(wang)或者(zhe)(zhe)溶(rong)解(jie)(jie),并(bing)釋(shi)放(fang) 51 鉻.。上清中(zhong) 51 鉻的釋(shi)放(fang)量與靶(ba)細(xi)胞(bao)的死亡(wang)及功能 T 細(xi)胞(bao)的數量成正比。