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人胚胎干細胞無血清培養基P04-77120K適用于(yu)人胚胎干細胞培養,即用型(xing)PowerStem HPSC。
人胚胎干細胞無血清培養基P04-77120K儲存方法:2-8℃
應用:
應(ying)用(yong)于人來源的T細胞培養(yang)(yang)擴增,培養(yang)(yang)基(ji)需(xu)(xu)要添(tian)加刺激性抗體和細胞因(yin)子(zi),另外每升培養(yang)(yang)基(ji)需(xu)(xu)要添(tian)加20ml 200mM的L。
操作:
平板培養:
1. 按照(zhao)已確(que)定的方法來準(zhun)備(bei)新鮮或者凍存(cun)的 PBMNCs (外周血單(dan)個核細胞(bao))
2. 用(yong)血計(ji)數(shu)(shu)器計(ji)數(shu)(shu)細(xi)胞(bao)數(shu)(shu)量
3. 轉移適當數(shu)量(liang)的細胞(bao)到含有培養(yang)基(已(yi)加入細胞(bao)因子和刺激抗體)的培養(yang)瓶(ping)中
4. 把培(pei)(pei)養(yang)瓶放入(ru)培(pei)(pei)養(yang)箱中, 37°C , 5% CO2 培(pei)(pei)養(yang).
產(chan)品特性:
Nobimpex 無血清 T 細(xi)胞(bao)培養基(ji) (Product number N103-1000) 已經經過嚴格的(de)測(ce)試可(ke)用(yong)于(yu) PBMNC 中(zhong)的(de) T 細(xi)胞(bao)擴(kuo)增。本產品(pin)已與其(qi)他幾種商業化可(ke)用(yong)的(de)無血清培養基(ji)做了 T 細(xi)胞(bao)擴(kuo)增比(bi)較。實驗(yan)中(zhong),200,000 PBMNCs/ml 在本產品(pin)和(he)另一商業化培養基(ji)中(zhong)培養 7 天(tian),培養基(ji)含有 100 IU/ml IL-2 和(he) anti-CD3 (OKT3, 20ng/ml) 抗體(ti)。.
實驗中(zhong)擴增的 T-細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)使用(yong) 51 鉻釋(shi)放分析來測(ce)試(shi)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)溶解能(neng)力。靶(ba)(ba)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao) (K562, 人慢性白血病細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)), 使用(yong) 51 鉻標記并連接到(dao) anti-CD3 (OKT3) Fc 受體(ti).。當與(yu)效應或者細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)毒(du) T 細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)混合時,,靶(ba)(ba)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)就會凋亡(wang)或者溶解,并釋(shi)放 51 鉻.。上清中(zhong) 51 鉻的釋(shi)放量(liang)與(yu)靶(ba)(ba)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的死亡(wang)及功能(neng) T 細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的數(shu)量(liang)成正比。